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The role of MEF2C in endothelial cells
Caterina Sturtzel
Art der Arbeit
Diplomarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Fakultät für Lebenswissenschaften
Betreuer*in
Erhard Hofer
DOI
10.25365/thesis.175
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-29754.61930.160070-7
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Abstracts
Abstract
(Deutsch)
VEGF (Vascular endothelial growth factor) ist der Hauptregulator für die Ausbildung neuer Gefäße aus bereits bestehenden durch Sprossung. Dieser Prozess wird Angiogenese genannt. MEF2C (Myocyte Enhancing Factor 2C) ist ein Transkriptionsfaktor, von dem mittels Microarray Analyse gezeigt wurde, dass er in Endothelzellen speziell durch VEGF hoch reguliert wird. Im Zuge dieser Arbeit wurden die notwendigen Konstrukte hergestellt und die Regulierung und mögliche Rolle von MEF2C in Endothelzellen während der Angiogenese untersucht.
Zuerst wurde mittels real time RT-PCR bestätigt, dass MEF2C speziell von VEGF 3- bis 5-fach hochreguliert wird, aber nicht vom allgemeinen Wachstumsfaktor EGF oder dem Entzündungsmediator IL-1. Danach wurde ein rekombinanter Adenovirus produziert, um eine Überexpression von MEF2C in HUVEC (menschliche Nabelschnur Endothelzellen) zu erreichen. Unter Verwendung dieses Adenovirus wurde der Einfluss von MEF2C auf die VEGF-vermittelte Hochregulierung einer Auswahl an Genen mittels real time RT-PCR analysiert.Die Ergebnisse zeigen, dass MEF2C nicht nur die Expression des endogenen MEF2C unterdrückt, sondern auch die Hochregulierung der stark VEGF-induzierbaren Gene DSCR1 und NR4A2 inhibiert. In Übereinstimmung mit der inhibitiven Wirkung auf wichtige VEGF-induzierbare Gene, hemmte MEF2C auch die Aussprossung im in vitro „spheroid sprout formation assay“. Die Netzwerkbildung im in vitro „Matrigel assay“ blieb durch MEF2C aber unverändert .
Diese Daten indizieren, dass MEF2C im Rahmen einer negativen Rückkopplung die Genexpression und die Ausbildung von Aussprossungen nach VEGF Behandlung reprimiert.
Abstract
(Englisch)
VEGF (Vascular endothelial growth factor) is the major regulator of the formation of new vessels by sprouting from pre-existing ones, a process termed angiogenesis. MEF2C (Myocyte Enhancing Factor 2) is a transcription factor, which was shown by microarray analysis to be specifically upregulated by VEGF in endothelial cells. This work generated the necessary experimental tools and investigated the regulation and potential role of MEF2C in endothelial cells during angiogenesis.
In a first step it was confirmed by real time RT-PCR that MEF2C is selectively upregulated 3- to 5-fold by VEGF, but not by the general growth factor EGF or the inflammatory cytokine IL-1. Then a recombinant adenovirus was engineered to achieve overexpression of MEF2C in human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). Using this adenovirus the influence of MEF2C on VEGF-mediated upregulation of several genes was analysed by real time RT-PCR. It was found that MEF2C not only suppressed the expression of the endogenous MEF2C, but also inhibited the upregulation of the strongly VEGF-inducible DSCR1 and NR4A2 genes. In accordance with the inhibitory action on major VEGF-inducible gene, MEF2C inhibited sprouting in the in vitro spheroid sprout formation assay. Tube formation in the in vitro Matrigel assay however seemed unaffected.
These data suggest that MEF2C may function to downmodulate gene expression and sprout formation after VEGF treatment in a negative feed-back loop.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Englisch)
MEF2C VEGF endothelial cells angiogenesis
Schlagwörter
(Deutsch)
MEF2C VEGF Endothelzellen Angiogenese
Autor*innen
Caterina Sturtzel
Haupttitel (Englisch)
The role of MEF2C in endothelial cells
Paralleltitel (Deutsch)
Die Rolle des MEF2C in Endothelzellen
Publikationsjahr
2007
Umfangsangabe
83 S.
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Erhard Hofer
Klassifikation
42 Biologie > 42.13 Molekularbiologie
AC Nummer
AC06766249
Utheses ID
102
Studienkennzahl
UA | 490 | | |