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The role of EphA7 and its binding partner ephrinA5 in angiogenesis
Angela Maria Peer
Art der Arbeit
Masterarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Fakultät für Lebenswissenschaften
Betreuer*in
Erhard Hofer
DOI
10.25365/thesis.12528
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-30170.48866.715663-7
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(Print-Exemplar eventuell in Bibliothek verfügbar)
Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Angiogenese bezeichnet die Entstehung von neuen Blutgefässen aus dem bereits bestehenden Netzwerk und stellt somit einen Schlüsselmechanismus für Entwicklung und Wachstum dar. Ephrine und ihre dazugehörigen Eph-Rezeptoren stellen eine der vier Familien von „Guidance-Molekülen“ für Axone dar, die auch eine sehr wichtige Rolle in der vaskulären Entwicklung und der Differenzierung zwischen Arterien und Venen spielen. Sie bilden die grösste Familie von Rezeptor-Tyrosin-Kinasen und verursachen durch komplexe Interaktion mit anderen Signalmolekülen und Signaltransduktionswegen eine biologische Antwort mit zwei unterschiedlichen Folgen- Repulsion oder Attraktion von Zellen. Die Eph-Ephrin Signalgebung wurde bereits in verschiedensten Aspekten untersucht, unter anderem in neuronalen Zellen, und wurde als potentielle Anti-Tumor Therapie eingestuft.
Das Ziel dieser Arbeit war es, die Reaktion von Endothelzellen auf EphrinA5-EphA7 Signalgebung bezüglich Migration und Proliferation zu untersuchen. Nachdem frühere Untersuchungen gezeigt haben, dass EphrinA5-EphA7 Expression zu Repulsion von neuronalen Zellen führt, wurden ähnliche Antworten in Endothelzellen erwartet.
Die Schwerpunkte der Experimente stellten das Generieren von Ephrin-Fc und monomerischen Ephrin Konstrukten und deren Einsatz in funktionellen Tests mit HUVEC (human umbilical venous endothelial cells) dar. Diese basierten auf dem Vorwissen, dass EphrinA7 ein Zielgen des Transkriptionsfaktors SOX18 ist. Durch transiente Transfektion von HUVEC mit SOX18-IRES/GFP wurde die Expression von EphA7 ausgelöst. HUVEC, die mit SOX18/GFP transient transfektiert wurden, reagierten mit Retraktion auf die Konfrontation durch mit Antikörper geclustertem EphrinA5-Fc. Ein weiterer Ansatz, in dem Zellen mit SOX18/GFP Adenovirus infiziert und EphrinA5-Fc, das mit Protein G Polystyrene Kugeln geclustert wurde, ausgesetzt wurden, führte zu keiner Reaktion. In einem in vitro Wundheilungsversuch, in dem EphrinA5-Fc Fusionskonstrukte, EphrinA5 Monomere und Kontroll-Fc verwendet wurden, wurden keine signifikanten Ergebnisse erzielt.
Zusammenfassend kann man sagen, dass es sich bei den erzielten Daten um die ersten Schritte handelt, um die Rolle von EphA7 in Endothelzellen besser zu beleuchten, die in zukünftigen Studien weiterverfolgt werden sollten.
Abstract
(Englisch)
Angiogenesis denotes the generation of new blood vessels from the pre-existing network and is therefore a key mechanism in development and growth. Ephrins and their corresponding Eph receptors form one of four families of axon guidance molecules, which have been revealed to be crucial players in vascular development and arteriovenous differentiaton. They constitute the largest family of receptor tyrosine kinases and evoke by complex interaction with other signalling molecules and signal transduction pathways a biological response with two different outcomes- repulsion or attraction of cells. Eph-ephrin signaling has already been extensively studied in various aspects, including neuronal cells, and has been considered as potential anti-tumor therapy.
The purpose of this work was to investigate the response of endothelial cells to ephrinA5-EphA7 signaling in the context of migration and proliferation. Since previous research has revealed that ephrinA5-EphA7 expression leads to repulsion of neuronal cells, similar responses were expected in endothelial cells. The experiments focused on the generation of ephrin_fc and monomeric ephrin constructs and theirs use in functional assays with HUVEC (human umbilical venous endothelial cells). They were based on previous findings that EphrinA7 is a target gene of the transcription factor SOX18. Expression of EphA7 was driven by transient transfection of HUVEC with SOX18-IRES/GFP. Confronting the cells with antibody-clustered ephrinA5-Fc lead to the expected retraction of the cells.
Whereas HUVEC transiently transfected with SOX18/GFP showed retraction when treated with clustered ephrinA5-Fc, a complementary approach using adenovirus SOX18/GFP infected cells and protein G polystyrene particle-clustered ephrinA5-Fc lacked a response.
A wound healing assay, in which ephrinA5-Fc fusion constructs, ephrinA5 monomers and control Fc have been used, did not show any noticeable results. Therefore, the data obtained so far are a first step towards the elucidation of the role of EphA7 in endothelial cells but need to be followed up in future studies.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Englisch)
angiogenesis Eph receptors ephrins guidance molecules endothelial cells ephrin-Fc fusion constructs
Schlagwörter
(Deutsch)
Angiogenese Eph-Rezeptoren Ephrine "Guidance"-Molekuele Endothelzellen Ephrin-Fc Fusionskonstrukte
Autor*innen
Angela Maria Peer
Haupttitel (Englisch)
The role of EphA7 and its binding partner ephrinA5 in angiogenesis
Paralleltitel (Deutsch)
Die Rolle von EphA7 und seinem Bindungspartner EphrinA5 in der Angiogenese
Paralleltitel (Englisch)
The role of EphA7 and its binding partner ephrinA5 in angiogenesis
Publikationsjahr
2010
Umfangsangabe
72 S.
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Erhard Hofer
Klassifikation
42 Biologie > 42.13 Molekularbiologie
AC Nummer
AC08779432
Utheses ID
11297
Studienkennzahl
UA | 066 | 830 | |