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Bestimmung der "Organic anion transporting polypeptides" in Ovarialkarzinomen mittels Immunfluoreszenz-Mikroskopie und Immunhistochemie

Cihanguel Sanlioglu

Art der Arbeit

Diplomarbeit

Universität

Universität Wien

Fakultät

Fakultät für Lebenswissenschaften

Betreuer*in

Walter Jäger

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DOI

10.25365/thesis.13003

URN

urn:nbn:at:at-ubw:1-29108.34436.641770-3

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Abstracts

Abstract

(Deutsch)

Etwa 90% der bösartigen Ovarialtumoren entstehen aus dem Ovaroberflächenepithel. Die Behandlung des Ovarialkarzinoms hat noch immer trotz modernster Therapieverfahren und Einsatz neuester Chemotherapeutika einen begrenzten Erfolg. Prognostisch stellt das Ovarialkarzinom das ungünstigste Genitalkarzinom dar, das aufgrund der Symptomlosigkeit oder eines Symptommangels sowie schlechter Screeningmaßnahmen erst im fortgeschrittenen späten Stadium erkannt wird und daher die Haupttodesursache unter den gynäkologischen Tumoren ist. Darüber hinaus kommt es unter einer Chemotherapie häufig zu einer Chemoresistenz. Die Standardtherapie für eine Patientin in einem fortgeschrittenen Stadium mit einer platinbasierten Kombinationstherapie als Kombinationstherapie führt häufig zu einem Rezidiv. Oberstes Ziel ist es daher, potentielle Wirkstoffe für die Chemotherapie zu entwickeln, um den Tumor zu beseitigen. Die Transporterfamilie der „Organic Anion Transporting Polypeptides“ (OATPs), die zur Familie der „Solute Carriers“ (SLC) gehört und auch als SLC21A-Subfamilie bezeichnet wird, ist an der Aufnahme von verschiedenen Chemotherapeutika beteiligt. Untersuchungen von OATPs scheinen daher möglicherweise einen wichtigen Therapieansatz für die Entdeckung neuer Zytosatika zu liefern. Ziel dieser vorliegenden Diplomarbeit war es, die Lokalisation von OATP 1B1/1B3, 2A1, 2B1, 3A1, 4A1, 5A1 und 6A1 in Paraffin eingebetteten Gewebeproben von Patientinnen mit einem Ovarialkarzinom mittels Immunfluoreszenz und immunhistochemischer Färbemethoden zu untersuchen. Doppelimmunfluoreszenzfärbungen wurden durchgeführt, um eine Kolokalisation der OATPs mit Markern für epitheliale und endotheliale Zellen darzustellen. CK19 (epitheliale Zellen) oder CD34 (vaskuläre endotheliale Zellen) dienten als zelluläre Marker, um die Lokalisation der OATPs zu bestimmen. In den Überlappungen der Bilder der jeweiligen OATPs mit CK19 oder CD34 konnten die OATPs durch eine Gelb-Orangefärbung in den zellulären Membranen nachgewiesen werden. Ergebnisse zeigten, dass OATP 1B1/1B3, OATP 2A1, OATP 3A1, OATP 4A1 und OATP 5A1 tatsächlich in den CK19-positiven epithelialen Zellen lokalisiert sind. Mit dem Gefäßmarker CD34 erfolgten Doppelfärbungen zum Nachweis von OATP 2A1, OATP 2B1 und OATP 4A1. Außerdem wurden immunhistochemische Studien mit OATP 1B1/1B3 und OATP 4A1, die durch eine Braunfärbung der epithelialen Zellmembranen dargestellt wurden, durchgeführt. Zusammenfassend kann festgestellt werden, dass sowohl „Leber-spezifische“ als auch ubiquitär vorkommende OATPs in den Ovarialkarzinompräparaten nachzuweisen sind. Daher könnten diese Transportproteine für die Wirksamkeit von Arzneistoffen und Hormonen bei diesen Tumoren von Bedeutung sein.

Abstract

(Englisch)

Epithelial ovarian carcinomas, which arise in the ovarian surface epithelium, constitute 90% of ovarian cancers. Treatment of ovarian cancer often has a limited success despite the application of modern therapy methods. The tumor has the worst prognosis of all gynecological malignancies, because due to the lack of sensitive diagnostic tools and non-specific clinical symptoms, ovarian cancers are not diagnosed mostly after the cancer has spread beyond the ovaries. Additionally, these malignancies are often resistant to anticancer chemotherapy. The standard first-line treatment for advanced-staged ovarian cancer is a platinum-based chemotherapy. However many patients experience a relapse following platinum-containing chemotherapy treatment. Therefore, the aim is to find novel targets for anticancer chemotherapy. The transporters from the family of organic anion transporting polypeptides (OATPs), classified as subfamily SLC21A within the superfamily of solute carriers (SLC), are mainly involved in the uptake of various anticancer drugs. Investigations of this transporter family seem to be suitable as an important therapeutic approach for the discovery of anticancer agents. The purpose of the present diploma thesis was to investigate localization of OATP 1B1/1B3, 2A1, 2B1, 3A1, 4A1, 5A1 and 6A1 in paraffin embedded tissue sections from ovarian cancer patients via immunofluorescence and immunohistochemical staining methods. Double immunofluorescence staining was done to show a possible co-localization of OATPs with marker for epithelial and endothelial cells. Therefore, cellular markers like CK19 (epithelial) or CD34 (vascular endothelial cells) were used to determine the localization of the OATPs. In the overlay picture of specific OATPs and CK19 or CD 34, respectively, OATPs were demonstrated at the cell surface by a yellow to orange color of cellular membranes. The results indicated that OATP 1B1/1B3, OATP 2A1, OATP 2B1, OATP 3A1, OATP 4A1 and OATP 5A1 are indeed located in epithelial cells that give a positive staining for CK19. Double staining images were detected for CD34 and OATP 2A1, OATP 2B1 and OATP4A1. Additionally, in immunohistochemical studies, OATP 1B1/1B3, and OATP 4A1 were visualized as clear brown staining of epithelial cell membranes. Taken together, these studies show that OATPs are widely present in ovarian tissue. Therefore, in subsequent studies, the importance of different OATPs for the cellular uptake of anticancer drugs should be investigated in ovarian cancer specimens.

Autor*innen

Cihanguel Sanlioglu

Haupttitel (Deutsch)

Bestimmung der "Organic anion transporting polypeptides" in Ovarialkarzinomen mittels Immunfluoreszenz-Mikroskopie und Immunhistochemie

Paralleltitel (Englisch)

Determination of "organic anion transporting polypeptides" in ovarian cancer by immunofluorescence microscopy and immunohistochemistry

Publikationsjahr

2011

Umfangsangabe

77 S.

Sprache

Deutsch

Beurteiler*in

Walter Jäger

Klassifikationen

44 Medizin > 44.40 Pharmazie, Pharmazeutika ,

44 Medizin > 44.40 Pharmazie, Pharmazeutika

AC Nummer

AC08450495

Utheses ID

11704

Studienkennzahl

UA | 449 | | |

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Schlagwörter