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Experimental targeting of basal-like breast cancer in vitro
Simone Klingenbrunner
Art der Arbeit
Diplomarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Zentrum für Molekulare Biologie
Betreuer*in
Johann Rotheneder
DOI
10.25365/thesis.19941
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-30013.17558.829170-0
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Abstracts
Abstract
(Deutsch)
15% aller Brustkrebszellen sind Mammakarzinome vom Basaltyp (BLBC), ein aggressiver Subtyp mit schlechter Heilungsprognose. Diese Zellen sind dreifach negativ (Östrogen, Progesteron, Her2/neu), was eine konventionelle Behandlung nicht möglich macht. Die Inhibierung verschiedener Signalwege könnte eine alternative Therapie darstellen.
Um herauszufinden welche Signalwege eine Schlüsselrolle für diese Zellen spielen, wurden Dosis-Wirkungskurven (MTT-Assay) mit verschiedenen Inhibitoren, Zytotoxinen und Kombinationen beider erstellt. Es konnte gezeigt werden, dass der NF-κB Signalweg eine wichtige Rolle für das Überleben der BLBC Zellen spielt (HCC-38, HCC-1937, MDA-MB-231). Immunoblotting des kanonischen NF-κB Signalweges zeigte, dass unbehandelte Basalzellen die Proteine NF-κBp65 und phospho-NF-κBp65 überexpremierten. Die Inhibitoren Violacein, MG-132, BAY 11-7082 und Akt Inhibitor IV waren imstande die Expression von NF-κBp65 zu inhibieren oder zu vermindern. Die Inhibitoren Violacein, MG-132 und Akt Inhibitor IV verringerten zusätzlich auch die Expression von IκB-α und phospho-IκB-α in fast allen untersuchten Zellen. Die IKK Proteine waren unterhalb des Detektionslimits des Western Blots. Diese Ergebnisse zeigten, dass das Überleben der BLBC vom NF-κB Signalweg abhängt. Alle verwendeten Inhibitoren dieses Signalweges, mit Ausnahme des Tpl2 Kinase Inhibitors (Wachstumsarrest), führten zu einer Eradikation der Zellen (IC50: 0,01 µM – 3,4 µM). Die Regulation dieses Signalweges scheint sehr kompliziert zu sein und es liegt die Vermutung nahe, dass es eine Kommunikation zwischen dem kanonischen NF-κB Signalweg und anderen Signalwegen gibt. Zusammenfassend kann gesagt werden, dass es vielversprechend scheint, alternative Therapien für das Mammakarzinom vom Basaltyp auf dem NF-κB Signalweg basieren zu lassen.
Abstract
(Englisch)
15% of all breast cancers belong to the basal-like breast cancer type (BLBC), an aggressive subtype with poor prognosis. This subgroup is triple negative (hormone receptors of estrogen, progesterone and for Her2) impairing conventional treatment strategies. Thus, we investigated targeting of signaling pathways as option in BLBC.
By using MTT-assays, we established dose-response curves with signaling inhibitors, cytotoxics and combinations of both. We discovered that the NF-κB pathway is of vital importance for BLBC cancer cells (HCC-38, HCC-1937 and MDA-MB-231). Immunoblotting of the canonical pathway showed that untreated BLBC were overexpressing phosphorylated and unphosphorylated NF-κBp65 protein. Further, the inhibitors violacein, MG-132, BAY11-7082 and Akt Inhibitor IV were able to supress or downregulate the expression of NF-κBp65. The inhibitors violacein, MG-132 and Akt Inhibitor IV led to a downregulation of the phosphorylated and unphosphorylated IκB-α protein in almost all investigated cells. In contrast, IKK proteins were below the detection limit of the Western blot.
These experiments demonstrate that the survival of BLBC in vitro relies on the NF-κB pathway. All used inhibitors of this pathway, except Tpl2 Kinase Inhibitor (growth arrest), led to a complete eradication of BLBC (IC50: 0.01 µM – 3.4 µM). Moreover, the canonical NF-κB pathway is likely interacting with other signaling pathways emphasizing the aggressive behavior of this subtype. These data suggest that therapeutic strategies based on the NF-κB pathway may be a promising approach for the treatment of BLBC.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Englisch)
mamma carcinoma basal-like subtype NF-kappa B signaling pathway targeted inhibition
Schlagwörter
(Deutsch)
Mammakarzinom Basaltyp NF-kappa B Signalweg zielgerichtet Inhibierung
Autor*innen
Simone Klingenbrunner
Haupttitel (Englisch)
Experimental targeting of basal-like breast cancer in vitro
Paralleltitel (Deutsch)
Experimentelles Targeting des Mammakarzinoms vom Basaltyp
Publikationsjahr
2012
Umfangsangabe
95 S. : Ill., graph. Darst.
Sprache
Englisch
Beurteiler*innen
Johann Rotheneder ,
Robert Mader
AC Nummer
AC10856670
Utheses ID
17815
Studienkennzahl
UA | 490 | | |