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Bestimmung der Enzymaktivität von Metalloproteinen in verschiedenen Blütenmaterialien
Barbara Janka
Art der Arbeit
Masterarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Fakultät für Chemie
Betreuer*innen
Annette Rompel ,
Annette Rompel
DOI
10.25365/thesis.21846
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-29527.05695.569363-1
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(Print-Exemplar eventuell in Bibliothek verfügbar)
Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Im Zuge dieser Masterarbeit wurden zwei Themen behandelt.
Zunächst wurde das Typ-III-Kupferprotein Aureusidinsynthase aus Löwenmäulchen isoliert. Dazu wurden verschiedene Isolierungsprotokolle entwickelt und getestet. Anschließend wurde dieses Protein ersten Reinigungsschritten unterzogen und seine Aktivität photometrisch und mittels HPLC bestimmt. Außerdem wurde Butein, in Bezug auf seine Eignung als Substrat zur photometrischen Bestimmung getestet. In weiterer Folge wurden die Enzymaktivitäten der Aureusidinsynthase in Dahlia sp. und Coreopsis lanceolata verglichen.
Das Ziel des zweiten Teils dieser Arbeit war die Entwicklung eines photometrischen Aktivitätstests für die Bestimmung der Enzymaktivität des Eisenproteins Flavon Synthase. Dazu wurden aus Petroselinum crispum Proteinproben gewonnen und mittels Ionenaustauschchromatographie getrennt. Auf Basis der aktuellen Literatur wurden zwei Protokolle für die Verfolgung der durch FNS katalysierten Reaktion entwickelt und getestet. Neben der Variation der Parameter des Aktivitätstests wurde auch die Isolierung aus Petersilie den spezifischen Eigenschaften des Zielproteins angepasst.
Abstract
(Englisch)
The focus of this thesis was on two different topics. First, the type-III-copper protein aureusidin synthase was isolated. Therefore different isolation protocols have been developed and tested. Subsequently, this protein was first subjected to purification steps, and its activity was then determined photometrically and by HPLC. In addition, butein was examined for its suitability as a substrate for the photometric determination. Finally the enzyme activities of aureusidin synthase in Dahlia sp. and Coreopsis lanceolata were compared.
The aim of the second part of this work was to develop a photometric activity assay for the determination of the enzyme activity of the iron protein flavone synthase. The protein samples werde obtained from Petroselinum crispum and then separated by ion exchange chromatography. Based on current literature, two protocols for the observation of the reaction catalyzed by FNS were developed and tested. In addition to the variation of the parameters of the activity tests, the isolation from parsley has been adapted to the specific properties of the target protein.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Englisch)
flavone synthase aureusidin synthase flavonoid 2-oxoglutarate dependant deoxygenases
Schlagwörter
(Deutsch)
Flavon Synthase Aureusidinsynthase Flavonoide 2-Oxoglutarat abhängige Deoxygenasen
Autor*innen
Barbara Janka
Haupttitel (Deutsch)
Bestimmung der Enzymaktivität von Metalloproteinen in verschiedenen Blütenmaterialien
Publikationsjahr
2012
Umfangsangabe
VII, 60,V S. : Ill., graph. Darst.
Sprache
Deutsch
AC Nummer
AC10502702
Utheses ID
19515
Studienkennzahl
UA | 066 | 863 | |