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Interplay between microRNA-21 and Sprouty2 in non small cell lung cancer-derived cell lines
Vanita Vanas
Art der Arbeit
Diplomarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Fakultät für Lebenswissenschaften
Betreuer*in
Hedwig Sutterlüty-Fall
DOI
10.25365/thesis.22750
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-29440.68096.202370-5
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Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Einer einzelnen microRNA ist es moglich uber die Bindung an den 3’ untranslatierten
Bereich hunderte mRNAs zu regulieren. Von einigen microRNAs ist bekannt, dass sie in Krebs dereguliert sind. Zu dieser Gruppe von microRNAs gehört auch microRNA-21; sie agiert als sogenanntes oncomiR und ist in einer Vielzahl verschiedener Tumoren überexpremiert. Bekannte Substrate von miR-21 sind Tumorsupressoren wie ProgrammedCellDeath4, PhosphataseAndTensinHomolog, Sprouty1 und Sprouty2.
In dieser Studie haben wir die microRNA-21 Expression im Lungenkrebs untersucht und herausgefunden, dass in kultivierten Lungenkrebszelllinien die Levels von microRNA-21 kaum von normalen Lungenfibroblasten abweichen. Die Korrelation microRNA-21 Expression und Proteinlevel von ProgrammedCellDeath4, PhosphataseAndTensinHomolog und Sprouty war insignifikant. Die Proliferationsrate der Zelllinien stand in keinem Zusammenhang zu den gemessenen miR-21 Levels ebenso wie der Unterschied von microRNA-21 Expression in Adenokarzinomen und Plattenzellkarzinomen.
Zelllinien, die eine onkogene Mutation im Ras Gen habenzeigen im Mittel zwar geringfügig höhere microRNA-21 Werte, aber eine ektopische Expression von onkogen mutierten H-, K- und N-Ras führte zu keiner Veränderung der microRNA-21 Expression Während Überexpression von Sprouty1 keinen Effekt auf microRNA-21 hat, führen hohe Levels von Sprouty2 zu einer signifikanten Reduktion der microRNA-21 Expression.
Zudem wurden verschiedene Strategien zur Modulierung der microRNA-21 Expression verglichen. Überexpression von verkürzten primiR 21 RNA durch ein virales System zeigte die gewünschte Wirkung. Um microRNA-21 zu inhibieren wurden verschiedene Ansatze ausprobiert, wobei nur Zellen der Zelllinie U373, die mit dem sponge eraser Konstrukt infiziert wurden, signifikant reduzierte microRNA-21 Expression zeigen. Diese Daten fuhren zu der Annahme, dass die Produktion von sponge eraser Konstrukten die beste Strategie ist.
Abstract
(Englisch)
MicroRNAs can regulate hundreds of mRNA by binding at the 3’ untranslatedRegions. Some microRNAs are known to be deregulated in cancer. MicroRNA-21is known to act as an oncomiR. Identified targets of miR-21 are tumor suppressors like ProgrammedCellDeath4, PhosphataseAndTensinHomolog,Sprouty1 and Sprouty2.
In this study we investigated miR-21 expression in non small cell lung cancer (NSCLC) derived cell lines and discovered that in cultured NSCLC derived cell lines microRNA-21 expression is comparable to the levels in normal lungfibroblasts. MicroRNA-21 levels failed to show inverse correlation to the protein expression of ProgrammedCellDeath4, PhosphataseAndTensinHomolog and Sprouty. We were unable to detect correlation between expression of miR-21and proliferation rate as well no correlation of microRNA-21 expression between cell lines derived from adenocarcinoma and squamous cell carcinoma was found.
Although cell lines harboring an oncogenic mutation in the Ras gene show on
average higher levels, overexpression of oncogenic H-, K- and N-Ras does not lead
to an alteration of microRNA-21 expression. While overexpression of Spry1 has no effect on miR-21 levels, high levels of Spry2 lead to reduced microRNA-21 expression.
Additionally we compared different strategies to modulated miR-21levels. Overexpressing of a shortened primiR 21 RNA worked at least in one of the chosen cell lines. In order to achieve inhibition of microRNA-21 we tested different strategies. Only cells from U373 cell lines, which were infected with a so called sponge eraser construct show significant reduced microRNA-21 levels. These data indicate that production of sponge eraser constructs is the most powerful way to interfere with microRNA-21.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Englisch)
microRNA-21 Sprouty NSCLC-derived cell lines
Schlagwörter
(Deutsch)
microRNA-21 Sprouty Lungenkrebs
Autor*innen
Vanita Vanas
Haupttitel (Englisch)
Interplay between microRNA-21 and Sprouty2 in non small cell lung cancer-derived cell lines
Paralleltitel (Deutsch)
Zusammenspiel von microRNA-21 und Sprouty2 in Lungenkrebszelllinien
Publikationsjahr
2012
Umfangsangabe
108 S.
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Hedwig Sutterlüty-Fall
AC Nummer
AC10497432
Utheses ID
20327
Studienkennzahl
UA | 442 | | |