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The human Ig-family member CD147 regulates T cell activation
Verena Zojer
Art der Arbeit
Diplomarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Zentrum für Molekulare Biologie
Betreuer*in
Hannes Stockinger
DOI
10.25365/thesis.2616
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-30477.43601.367163-3
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Abstracts
Abstract
(Deutsch)
CD147 gehört zur Familie der Typ I transmembranen Immunglobulin (Ig) ähnlichen Glykoproteine, und wird bei der T-Zell Aktivierung hochreguliert. Einige Entdeckungen deuten darauf hin, dass CD147 die T-Zell Aktivierung negativ reguliert. Passend dazu zeigten vorangegangene Experimente in Prof. Stockinger’s Labor, dass CD147
Knockdown T-Zellen erhöht Interleukin-2 (IL-2) produzieren, und eine Tendenz zur T-Helfer 1 (Th1) Zytokin-Antwort aufweisen.
In dieser Studie untersuchte ich, welche strukturelle Determinanten von CD147 die antagonistische Funktion von CD147 in der T-Zell Aktivierung ausführen. Mittels Rekonstituierung von CD147 Knockdown Jurkat T-Zellen mit siRNA resistenten CD147 Deletions- und Swap- Mutanten, stellten wir fest, dass die extrazelluläre und die transmembrane
Domäne von CD147 kooperieren, um die IL-2 Promotor Aktivität infolge der T-Zell Aktivierung zu verringern. Dieser Effekt war zumindest teilweise von der negativen Regulation des „nuklearen Faktor aktivierter T-Zellen“ (NFAT) abhängig. Weitere Experimente zeigten, dass auch die Aktivität des „nuklearen Faktors k B“ (NF-kB) und die Aktivität der „fokalen
Adhäsionskinase“ (FAK) durch CD147 beeinflusst werden.
Da die CD147 Mutante ohne cytoplasmatischer Domäne die IL-2
Promotor Aktivität verringern konnte, übt CD147 seine Funktion
vermutlich über ein anderes Transmembranprotein aus. Deshalb wurde der Beitrag potenzieller CD147 Interaktionspartner zur Regulation der IL-2 Promotor Aktivität analysiert. Die Oberflächenexpression von CD43 und CD98, und überraschender Weise auch die des co-stimulatorischen Moleküls CD28, war in CD147 Knockdown Zellen erhöht. Deshalb wurden CD28, CD43 und CD98 Knockdown Zellen hergestellt, und deren IL-2
Promotor Aktivität getestet. CD28 und CD98, nicht aber CD43, Knockdown Zellen wiesen eine verringerte transkriptionelle Aktivität des IL-2 Promotors auf. Daher könnte die Deregulation dieser Moleküle für die verstärkte IL-2 Produktion in CD147 Knockdown verantwortlich sein. Wir spekulieren, dass CD147 die Funktion dieser Transmembranproteine während der T-Zell Aktivierung beeinflusst und dabei die Immunantwort verringert.
Abstract
(Englisch)
CD147 belongs to the family of type I transmembrane immunoglobulin (Ig) like glycoproteins and is upregulated upon T cell activation. Several findings point to role of CD147 as negative regulator of T cell activation. In line with these findings, previous studies in Prof. Stockinger’s laboratory revealed that CD147 knockdown T cells exhibit higher interleukin-2 (IL-2) production and a T helper 1 (Th1) cytokine bias.
Here I analyzed which structural determinants of CD147 are
responsible for CD147 antagonistic function on T cell stimulation. By reconstituting CD147 silenced Jurkat T cells with small interfering RNA (siRNA) resistant CD147 deletion and swap mutants, we could show that the extracellular and the transmembrane domain of CD147 cooperated to decrease the IL-2 promoter activity upon T cell stimulation. This effect was at least partially due to negative regulation of the nuclear factor of activated T cells (NFAT). Further experiments revealed that also the activation of nuclear factor k B (NF-kB) and the activity of the focal adhesion kinase (FAK) was influenced by CD147.
The fact that the CD147 mutant lacking the cytoplasmic domain
could inhibit the IL-2 promoter activity indicated that CD147 exerts its function via another transmembrane protein. Therefore, we analyzed the contribution of potential interaction partners of CD147 to the regulation of the IL-2 promoter activity. The surface expression level of the CD147 of CD43 and CD98, and surprisingly also of the co-stimulatory molecule CD28, was found to be upregulated upon CD147 silencing. Therefore, silenced T cells for CD28, CD43 and CD98 were generated and were tested for the IL-2 promoter activity. CD28 and CD98, but not CD43 silenced cells, displayed decreased transcriptional activity of the IL-2 promoter, making the deregulation of these molecules a likely cause for the enhanced IL-2 production in the CD147 knockdown cells. We
speculate that CD147 might affect the function of these receptors during T cell activation, thereby dampening the immune response.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Englisch)
CD147 basigin T cell activation immunoglobulin
Schlagwörter
(Deutsch)
CD147 Basigin T-Zell Aktivierung Immunoglobulin
Autor*innen
Verena Zojer
Haupttitel (Englisch)
The human Ig-family member CD147 regulates T cell activation
Paralleltitel (Deutsch)
Das menschliche Ig-Familienmitglied CD147 reguliert die T-Zell Aktivierung
Paralleltitel (Englisch)
The human Ig-family member CD147 regulates T cell activation
Publikationsjahr
2008
Umfangsangabe
94 S.
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Hannes Stockinger
AC Nummer
AC07654148
Utheses ID
2253
Studienkennzahl
UA | 490 | | |