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Characterization of budding yeast centromere proteins
Michael Maier
Art der Arbeit
Diplomarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Zentrum für Molekulare Biologie
Betreuer*in
Stefan Westermann
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Alle Rechte vorbehalten / All rights reserved
DOI
10.25365/thesis.28930
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-29523.84564.742970-0
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Abstracts

Abstract
(Deutsch)
Das Kinetochor ist eine konservierte eurkaryotische Organelle welches eine Schlüsselrolle im Zellzyklus spielt. Um die Chromosomen während der Zellteilung gleich aufzuteilen fungiert es als Mikrotubuli-Bindungsplattform, die das korrekte Sortieren und Segregieren der Schwesterchromatiden ermöglicht. Es ist ein komplexes Gefüge das, beispielsweise in Wirbeltier-Zellen, im Laufe des Zellzyklus aus über einhundert verschiedenen Proteinen an einem speziellen chromosomalen Locus, dem Zentromer, zusammengefügt wird. Viele dieser Protein-Bausteine sind wohl konserviert zwischen Pilzen und Menschen. Die zentrale Mikrotubuli-Bindungsplattform, das KMN Netzwerk, ist vermutlich das bemerkenswerteste Beispiel. Einige der Zentromernahen Proteine des Wirbeltier-CCAN's besitzen bekannte homologe im Ctf19-Komplex der Bäckerhefe, allerdings scheint die Konservierung zwischen diesen beiden Proteinnetzwerken insgesamt geringer. Ein Grund hierfür mögen die unterschiedlichem Mechanismen sein mit denen Hefezellen und Wirbeltierzellen den Locus ihres Zentromeres definieren. Unsere Bioinformatische Analyse jedoch wies auf bis dato unbekannte CCAN homologe in Hefe hin, einschließlich bekannter Ctf19-Komplex Proteine, Proteine des Hefe-Zentromeres und Hefeproteine die noch nicht als Zentromerproteine identifiziert wurden. Hier untermauere ich unsere Theorie, das das CCAN ein zwischen Hefe und Mensch konserviertes Proteinnetzwerk ist, durch biochemische und proteomische Analyse von rekombinanten und nativen Proteinen. Weiterhin untersuche ich eine mögliche Zellzyklus-abhängige Regulation des Hefe-CCAN's durch CDK1. Ich fand einige funktionell konservierte Zusammenhänge innerhalb des Hefe-CCAN's was eine Konservierung dieses Proteinnetzwerkes bestätigt. Weiterhin identifizierte ich einige von CDK1 phosphorylierte Stellen innerhalb des Hefe-CCAN's, wovon eine Ansammlung dieser am Amino-Terminus von ScCENP-U das hervorstechendste Merkmal ist.
Abstract
(Englisch)
The kinetochore is a conserved eukorytic organelle, pivotal during the cell cycle. In order to partition chromosomes equally during division, it provides a microtubule attachment platform that facilitates correct sister chromatid sorting and segregation. It is a complex structure, which in vertebrate cells is assembled during the course of the cell cycle from more than a hundred proteins onto a specialized chromosomal locus, the centromere. Many of these protein components are well conserved between yeast and man, most prominently those of the core microtubule attachment platform, the KMN network. Some of the centromere proximal proteins of the vertebrate CCAN have established homologues in the budding yeast Ctf19 complex but overall conservation appears weaker between these two protein networks. This could be due to different mechanisms yeast and vertebrate cells use to define the centromere locus. However, our bioinformatic analysis indicated hitherto unknown yeast CCAN homologues, including known Ctf19 complex proteins, budding yeast centromeric proteins and proteins that had not yet been identified as centromeric constituents in yeast. Here I aim to substantiate our theory, that the CCAN is a protein network conserved between yeast and man, through biochemical and proteomic analysis of recombinant and native proteins. Furthermore I investigate potential cell cycle dependent regulation of budding yeast CCAN proteins by CDK1. I found a number of functionally conserved relations within the budding yeast CCAN, supporting conservation of this protein network. I also identified a number of CDK1 phosphorylation sites within the budding yeast CCAN, the most striking being a cluster of CDK1 sites at the amino-terminus of ScCENP-U.

Schlagwörter

Schlagwörter
(Englisch)
Kinetochore Centromere Mitosis Ctf19 complex CCAN
Schlagwörter
(Deutsch)
Kinetochor Zentromer Mitose Ctf19 complex CCAN
Autor*innen
Michael Maier
Haupttitel (Englisch)
Characterization of budding yeast centromere proteins
Paralleltitel (Deutsch)
Charakterisierung von Zentromerproteinen der Bäckerhefe
Publikationsjahr
2013
Umfangsangabe
229 S. : Ill., graph. Darst.
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Stefan Westermann
Klassifikationen
30 Naturwissenschaften allgemein > 30.00 Naturwissenschaften allgemein: Allgemeines ,
42 Biologie > 42.15 Zellbiologie
AC Nummer
AC11613945
Utheses ID
25825
Studienkennzahl
UA | 490 | | |
Universität Wien, Universitätsbibliothek, 1010 Wien, Universitätsring 1