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Chlorophyllin and Friedreich's Ataxia
biological activity of chlorophyllin in intestinal enterocytes and neuronal cells
Barbara Schwaiger
Art der Arbeit
Masterarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Fakultät für Lebenswissenschaften
Betreuer*in
Hans Goldenberg
DOI
10.25365/thesis.29784
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-29494.20090.984464-2
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(Print-Exemplar eventuell in Bibliothek verfügbar)
Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Friedreich’s Ataxie ist mit einer Inzidenz von 1:50.000 die weltweit häufigste autosomal-rezessiv vererbbare Erkrankung und tritt hauptsächlich in der europäisch abstammenden Bevölkerung auf. Trotz intensiver Forschungstätigkeit existiert noch keine nachhaltige Therapie für die Erkrankten. [RICHARDSON et al., 2013]
Als möglichen Therapieansatz wurde von Sarsero et al. die positive Wirkung von Hämin auf die FXN Genexpression publiziert [SARSERO et al., 2003]. Basierend auf diesen Resultaten gelang es unserer Forschungsgruppe, mit Chlorophyllin den Frataxinlevel sowohl in verschiedenen Zelltypen als auch in primären Lymphozyten von FRDA Patienten zu erhöhen (nicht publiziert).
Das Ziel dieser in vitro Studie war es daher, eine sichere Dosis für Mg- und Cu-CHL festzulegen, die gleichzeitig den FXN Gehalt in den Zellen erhöht. Toxizitätsmessungen der differenzierten Caco-2 und neuronalen P19 Zellen ergaben eine sichere Verwendung von Chlorophyllin bis zur maximal getesteten Dosis von 50µM.
Eine Steigerung des FXN Gehalts konnte in den Caco-2 Zellen nur nach einstündiger Inkubation beobachtet werden. Durch den unerwarteten Anstieg des FXN Gehalts in den Kontrollzellen nach 24h und 48h konnte in den mit CHL behandelten Zellen kein weiterer Anstieg erreicht werden.
Im Unterschied zu den bestehenden Ergebnissen unserer Forschungsgruppe, konnte mittels Frataxin-ECLIA kein signifikanter Anstieg des FXN Levels in den mit CHL behandelten neuronalen P19 Zellen verzeichnet werden, wodurch angenommen werden kann, dass Chlorophyllin keinen positiven Effekt auf die Frataxinexpression in neuronalen P19 Zellen bewirkt.
Da die früheren Daten mit anderen Methoden (Western blot, Frataxin Protein Quantitiy Dipstick Assay) erhoben wurden, sollten die Analysen mit den unterschiedlichen Methoden parallel mit den gleichen Zelllysaten durchgeführt werden, um vergleichbare Ergebnisse zu erzielen.
Abstract
(Englisch)
Friedreich ataxia is the most common autosomal-recessive inherited disease worldwide, affecting 1:50,000 Caucasians. Despite a lot of intense research work there is still no sustainable treatment option for FRDA patients. [RICHARDSON et al., 2013]
Sarsero et al. demonstrated hemin as potent inducer of frataxin gene expression, which is the mutated gene in FRDA. [SARSERO et al., 2003] Based on these findings our group investigated the effects of other non-toxic porphyrin compounds and found that chlorophyllin compounds significantly increased FXN expression in various cell types as well as in primary lymphocytes from FRDA patients (unpublished data).
Therefore the aim of this in vitro study was to identify a safe dose of chlorophyllin compounds effective to up-regulate frataxin expression providing a scientific basis for CHL-studies in vivo.
Cytotoxicity measurements demonstrate no toxicity up to the maximum dose of 50µM in differentiated Caco-2 cells and P19 neuronal cells. This indicates a safe use up to the maximum dose for further experiments.
In differentiated Caco-2 cells only after one hour of incubation an increase of FXN content could be observed. Due to an unexpected increase in frataxin expression in untreated cells after 24h which was less pronounced after 48h, the results of treated cells are comparable to the control cells.
Despite to previous data of our group, indicating a positive effect on frataxin expression in CHL treated P19 neuronal cells, we could not confirm these observations by frataxin-ECLIA measurement in our experiments. FXN expression remained stable during 48h of treatment and results are comparable to untreated cells.
Since the existing data were assessed by Western blot analysis and by the Frataxin Protein Quantity Dipstick Assay, analysis should be performed simultaneously with the same cell lysates.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Englisch)
Friedreich's ataxia chlorophyllin frataxin Caco-2 cells P19 cells ECLIA
Schlagwörter
(Deutsch)
Friedreich's Ataxie Chlorophyllin Frataxin Caco-2 Zellen P19 Zellen ECLIA
Autor*innen
Barbara Schwaiger
Haupttitel (Englisch)
Chlorophyllin and Friedreich's Ataxia
Hauptuntertitel (Englisch)
biological activity of chlorophyllin in intestinal enterocytes and neuronal cells
Paralleltitel (Deutsch)
Chlorophyllin und Friedreich's Ataxie ; biologische Aktivität von Chlorophyllin in intestinalen Enterozyten und Neuronen
Publikationsjahr
2013
Umfangsangabe
X, 102 S.
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Hans Goldenberg
Klassifikationen
30 Naturwissenschaften allgemein > 30.00 Naturwissenschaften allgemein: Allgemeines ,
30 Naturwissenschaften allgemein > 30.30 Naturwissenschaften in Beziehung zu anderen Fachgebieten
AC Nummer
AC11081701
Utheses ID
26555
Studienkennzahl
UA | 066 | 838 | |