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The Role of Mitogen Activated Protein Kinase-Activated Protein Kinase 2 in Proliferation and Migration of Gastroesophageal Cancer Cells
Jasmin Stieger
Art der Arbeit
Masterarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Zentrum für Molekulare Biologie
Betreuer*in
Angela Witte
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Alle Rechte vorbehalten / All rights reserved
DOI
10.25365/thesis.31725
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-29447.09163.473466-0
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Abstracts

Abstract
(Deutsch)
MAPKAPKs (oder MKs) spielen eine wichtige Rolle in der Signaltransduktion und steuern zelluläre Prozesse wie Zellzyklus, Apoptose und Migration. Eine erhöhte MK2 Expression wurde für Tumorzellen beobachtet. Der Forschungsfokus dieser Masterarbeit lag auf der Charakterisierung von MK2 in gastroösophagealen Tumoren und deren Rolle in der Zellproliferation und Migration. Hierfür wurden immunhistochemische Färbungen von Patientengewebe sowie Immunfluoreszenzfärbungen von ösophagealen Tumorzelllinien durchgeführt. Eine weiteres Ziel in diesem Forschungsprojekt war es, den Einfluss von pharmakologischen MK2-Inhibitoren, Abschaltung des MK2-Gens mittels siRNA sowie MK2-Überexpression auf die Proliferation und Migration der Tumorzellen festzustellen. Die Effizienz von Silencing und Überexpression wurde mittels quantitativer RT-PCR von MK2 mRNA ermittelt. Zur Messung der Proliferation wurden die Zellzahl und der Zellmetabolismus bestimmt, sowie der Wachstumsverlauf fotografisch dokumentiert. Um einen möglichen Effekt von siRNA und MK2-Überexpression auf die Tumorzell-Migration festzustellen, wurde ein so genannter Scratch Assay durchgeführt. Die Untersuchung der MK2-Expression in ösophagealen Tumorzellen ergab der Literatur teilweise widersprechende Ergebnisse: Anders als erwartet, war die aktive Form von MK2 nicht im Zytosol sondern im Zellkern zu finden, was auf eine Zelltyp-spezifische Proteinregulation hindeutet. Weder die Anwendung von siRNA noch die Überexpression führten zu nennenswerten Effekten auf die Proliferation und Migration der untersuchten Zellen. In Bezug auf Proliferation unter dem Einfluss von pharmakologischen Inhibitoren konnte für den Inhibitor PF-3644022 eine vermutlich unspezifische dosisabhängige Wachstumsreduktion festgestellt werden. Zusammenfassend kann festgestellt werden, dass MK2 trotz der prominenten Expression keine evidente Rolle in der Proliferation oder Migration ösophagealer Tumorzellen spielt, was im Zusammenhang mit der aberranten Proteinverteilung stehen könnte und weitere Untersuchungen erfordert.
Abstract
(Englisch)
MAPKAPKs (or MKs) play an important role in signal transduction and regulate cellular processes like cell cycle control, apoptosis, and migration. Elevated levels of MK2 have been found in cancer cells. The focus of this master thesis was to investigate MK2 expression and its role in proliferation and migration of gastroesophageal cancer cells. MK2 expression was first determined with immunohistochemical staining of esophageal tumor tissue as well as with immunofluorescence staining of esophageal cancer cell lines. Also, the influence of pharmacological MK2 inhibitors, MK2 gene silencing and overexpression on proliferation and migration of tumor cells was investigated. Efficacy of silencing and overexpression was assessed by quantitative RT-PCR. To determine the effect on proliferation, a metabolic assay was performed, cell count was determined, and microscopic images were taken. To verify a possible effect of siRNA or overexpression on tumor cell migration, a scratch assay was performed. The results on MK2 expression provided data which were partially contradictory: While activated MK2 is generally expected to localize to the cytosol, it was primarily found in the nucleus of esophageal cancer cells pointing to a distinct MK2 regulation in this cell type. For the MK2 inhibitor PF-3644022 hydrate a dose-dependent growth reduction was observed. Furthermore, gene silencing or overexpression did not lead to substantial changes in the migration of these cancer cells. Summarizing it can be said that despite its prominent expression in esophageal cancer, no functional role of MK2 in proliferation or migration was evident which may relate to its aberrant protein distribution.

Schlagwörter

Schlagwörter
(Englisch)
Mitogen activated protein kinase-activated protein kinase MK2 proliferation migration gastroesophageal esophageal cancer carcinoma
Schlagwörter
(Deutsch)
Mitogen-aktivierte Proteinkinase-aktivierte Proteinkinase MK2 Proliferation Migration gastroösophageal ösophageal Krebs Karzinom
Autor*innen
Jasmin Stieger
Haupttitel (Englisch)
The Role of Mitogen Activated Protein Kinase-Activated Protein Kinase 2 in Proliferation and Migration of Gastroesophageal Cancer Cells
Paralleltitel (Deutsch)
Die Rolle der Mitogen-aktivierten Proteinkinase-aktivierten Proteinkinase 2 in Proliferation und Migration gastroösophagealer Krebszellen
Publikationsjahr
2014
Umfangsangabe
107 S. : Ill., graph. Darst.
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Angela Witte
Klassifikationen
42 Biologie > 42.13 Molekularbiologie ,
42 Biologie > 42.15 Zellbiologie
AC Nummer
AC11834125
Utheses ID
28206
Studienkennzahl
UA | 066 | 877 | |
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