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The role of the EGFR in intestinal stem cells
Vasfiye Bilge Göcen
Art der Arbeit
Masterarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Zentrum für Molekulare Biologie
Studiumsbezeichnung bzw. Universitätlehrgang (ULG)
Masterstudium Molekulare Biologie
Betreuer*in
Maria Sibilia
DOI
10.25365/thesis.36808
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-29848.48200.577453-9
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(Print-Exemplar eventuell in Bibliothek verfügbar)
Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Der Darm der Säugetiere ist ein multifunktionales Gewebe, das nicht nur für Verdauung und Absorption von Nährstoffen verantwortlich ist sondern auch eine wichtige Immunfunktion besitzt. Gleichzeitig bietet der Darm Millionen von Bakterien, sogenannten symbiotischen Mikroorganismen, eine Unterkunft. Der Dünndarm besteht aus zwei Einheiten, nämlich aus fingerähnlichen Strukturen, den Zotten (Villi), und darunter liegenden Gruften (Crypten). Beide Strukturen besitzen an der Oberfläche ein kontinuierliches säulenartiges Epithel.
Das Dünndarm-Epithel ist das schnellste selbsterneuernde Gewebe bei den Säugetieren. Ein Maus Dünndarmepithel erneuert sich selbst innerhalb von 5 Tagen.
Der EGF Rezeptor gehört zu der ErbB Familie der Rezeptor Tyrosin Kinasen und spielt eine Schlüsselrolle für Zellproliferation und Differenzierung, was unter anderem durch Aktivierung von MAPK/ERK und Akt-PI3K Signaltransduktionswegen erreicht wird. Der EGFR kann allerdings auch andere Signalwege wie Notch oder Hedgehog aktivieren.
Das Ziel meiner Masterarbeit ist, die Rolle des EGFR in den Stammzellen des Dünndarms zu zeigen. Dafür habe ich mit zwei Mausmodellen gearbeitet, mit denen ich den EGFR auf unterschiedliche Weise deletiert habe.
1) EGFRfl/flLGR5CreERT2EGFP Mäusen fehlt der EGFR in Lgr5+ Zellen nachdem Tamoxifen injiziert wird. Da das LGR5CreERT2EGFP knock-in Allel eine Mosaik-Expression hat, ist der EGFR wahrscheinlich nicht in allen Crypten des Darms deletiert.
2) EGFRfl/fl Villin Cre Mäuse besitzen keinen EGFR auf den gesamten Epithelzellen des Darms
Mit diesen zwei Mausmodellen konnte ich zeigen, dass die Deletion von EGFR die Differenzierung des Dünndarmepithels nicht beeinflusst. Allerdings wird die die Proliferation in den Crypten sowie die in vitro Organoid Formation beeinträchtigt.
Abstract
(Englisch)
The mammalian intestine is a multitasking tissue that is not only responsible for the absorption of nutrients but also has important immune functions, while being home to a multitude of commensal microorganisms. The intestinal epithelium is the most rapidly self-renewing tissue of the mammalian body, with a complete turnover every five days in the mouse.
EGF exerts its function by binding to the EGFR, a receptor tyrosine kinase, belonging to the ErbB family, which plays key roles in cell proliferation and cell differentiation, which is facilitated by its downstream signaling via the MAPK/ERK and the Akt-PI3K pathways, respectively. Moreover, crosstalk with other signaling pathways, e.g. the Hedgehog or Notch pathway have been described.
The aim of my master thesis is to investigate the role of EGFR in intestinal stem cells. To this end, I employed mice lacking the EGFR in different cell types of the intestine namely Lgr5+:
(1) EGFRfl/fl LGR5CreERT2EGFP mice lack the EGFR in LGR5+ stem cells following Tamoxifen injection. The LGR5CreERT2EGFP knock-in allele shows mosaic expression, therefore the EGFR is not deleted in every crypt.
(2) EGFRfl/fl Villin Cre mice lack the EGFR in all epithelial cells of the intestine, including crypt LGR5+ stem cells.
By using these two mouse models I was able to show that the lack of EGFR does not affect the differentiation of the intestinal epithelium but it impairs the proliferation in the crypt compartment as well as organoid formation in vitro.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Englisch)
EGFR EGFR deletion stem cells intestine intestinal stem cells colon crypts villi
Schlagwörter
(Deutsch)
EGFR Dünndarm Dickdarm Stammzellen Dünndarmstammzellen Crypten Zotten LGR5-Cre
Autor*innen
Vasfiye Bilge Göcen
Haupttitel (Englisch)
The role of the EGFR in intestinal stem cells
Paralleltitel (Deutsch)
Die Rolle des EGFRs in Dünndarmstammzellen
Publikationsjahr
2014
Umfangsangabe
102 S. : Ill., graph. Darst.
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Maria Sibilia
Klassifikation
42 Biologie > 42.13 Molekularbiologie
AC Nummer
AC12274464
Utheses ID
32624
Studienkennzahl
UA | 066 | 834 | |