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Biological significance of Carbonic Anhydrase IX in ovarian cancer
Isabel Ackermann
Art der Arbeit
Diplomarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Fakultät für Lebenswissenschaften
Studiumsbezeichnung bzw. Universitätlehrgang (ULG)
Diplomstudium Pharmazie
Betreuer*in
Walter Jäger
DOI
10.25365/thesis.37290
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-30288.85821.692061-5
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(Print-Exemplar eventuell in Bibliothek verfügbar)
Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Einleitung: Die Entstehung von Ovarialkarzinomen kann in den meisten Fällen nicht frühzeitig erkannt werden, weshalb Tumore oft erst im fortgeschrittenem Stadium diagnostiziert werden und zu einer äußerst ungünstigen Prognose führen. Außerdem verläuft die Erkrankung oft mit atypischen Symptomen oder sogar symptomlos, was die Diagnostik weiter erschwert. Daraus resultierte das Interesse neue Marker zu erforschen, die eine Entdeckung der Krankheit möglich machen. In diesem Zusammenhang wurde das Enzym Carboanhydrase IX genauer untersucht, welches an der pH Regulation von Tumorzellen beteiligt ist. Dieses sorgt für eine saure extrazelluläre Umgebung und ermöglicht so die Zellproliferation und Einwanderung in gesundes Gewebe. Methoden: Die Expression des Gens CA9, sowie die Expression des CAIX Proteins wurde mittels qPCR in Ovarialkarzinom-Zelllinien festgestellt, welche mit Cisplatin behandelt wurden. Mittels Western Blot wurden in den Zelllinien die CAIX Protein Levels bestimmt, wobei die Zellen mit DFX behandelt wurden, was zu Hypoxie-ähnlichen Bedingungen in der Zelle führt. Außerdem wurden Chemsensitivitäts-Assays durchgeführt, um die Überlebensrate der Zellen zu bestimmen, nachdem diese mit Carboplatin und einem CAIX-Inhibitor behandelt wurden.
Die lösliche Form von CAIX (sCAIX) wurde mittels ELISA analysiert, wobei die Konzentration in Abhängigkeit von der Behandlung mit einer Substanz ermittelt wurde, welche Hypoxie-ähnliche Bedingungen erzeugt.
Ergebnisse: Unter den hypoxischen Bedingungen kam es zu einer Abnahme der membrangebundenen Form des CAIX Proteins, sowie zu einer Zunahme der sCAIX Proteine. Dies führt zu der Annahme, dass eine Veränderung der hypoxischen Bedingungen zu einer Freisetzung von CAIX, von der gebundenen in die lösliche Form, führt. Außerdem konnte ein antagonistischer Effekt bei der Behandlung mit Carboplatin und einem CAIX Inhibitor beobachtet werden.
Des Weiteren führte die Behandlung mit Cisplatin zu einer Down-Regulation der Genexpression von CA9. Außerdem kann von den Untersuchungen abgeleitet werden, dass eine bestimmte Form des Clear Cell Karzinoms eine sehr hohe konstitutive Expression von CAIX aufweist.
Schlussfolgerung: Die Expression der CA9 mRNA, sowie die CAIX Proteinexpression sind signifikant in Ovarialkarzinom-Zelllinien. Dies könnte neue Möglichkeiten darstellen, um CAIX als Identifikationsmarker von Ovarialkarzinomen zu verwenden, sowie um den Fortschritt einer Behandlung bewerten zu können.
Abstract
(Englisch)
Background: The development of epithelial ovarian cancer is, in most cases, not detected at an early stage because of its lack of symptoms or even asymptomatic progress. It is a serious diagnosis with a rather dismal prognosis. This led to the interest of finding new drug targets or prognostic markers. In the case of ovarian cancer the pH-regulating enzyme carbonic anhydrase IX (CAIX) is of special interest. It is responsible for a change of pH in tumors, where an acidic environment is developed, which simplifies the proliferation and invasiveness of the tumor tissue.
Methods: The CAIX gene expression was detected with qPCR in ovarian cancer cell lines when treated with cisplatin. Furthermore, via Western Blot the CAIX protein levels were analyzed in cell lines, where hypoxia-like conditions were evoked. Chemosensitivity assays were done to determine the cell survival rate after treating them with cisplatin and in combination with a CAIX inhibitor.
In order to detect the soluble form of CAIX (sCAIX) dependent on inducing hypoxia-like conditions again, ELISA analysis was done.
Results: Under hypoxic conditions the membrane-bound form of CAIX was decreased and the levels of sCAIX were increased. This leads to the assumption that a change of the hypoxic conditions evokes a shedding of CAIX, from the membrane bound to the soluble form. Also an antagonistic interaction could be observed concerning the treatment with carboplatin and the CAIX inhibitor.
Furthermore, the treatment with cisplatin led to a down regulation of CA9 gene expression. It can also be derived that certain cell lines from clear cell carcinomas have a high constitutive expression of CAIX.
Conclusion: The expression of CA9 mRNA as well as the CAIX protein expression were significant in the ovarian cancer cell lines. This might give new possibilities in using CAIX as an identification marker of ovarian cancer or help evaluating the progress of ovarian cancer treatment.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Englisch)
CAIX ovarian cancer PCR HIF hypoxia
Schlagwörter
(Deutsch)
CAIX Ovarialkarzinom PCR HIF Hypoxie
Autor*innen
Isabel Ackermann
Haupttitel (Englisch)
Biological significance of Carbonic Anhydrase IX in ovarian cancer
Paralleltitel (Deutsch)
Biologische Signifikanz von Carboanhydrase IX in Ovarialkarzinomen
Publikationsjahr
2015
Umfangsangabe
66 S.
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Walter Jäger
Klassifikationen
44 Medizin > 44.42 Pharmazeutische Chemie ,
44 Medizin > 44.81 Onkologie
AC Nummer
AC12289848
Utheses ID
33051
Studienkennzahl
UA | 449 | | |