Detailansicht
Auxiliary-mediated synthesis of homogeneously N-glycosylated tumor necrosis factor ligand superfamily 6 (sFasL) analogs
Jia Hui Huang
Art der Arbeit
Masterarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Fakultät für Chemie
Studiumsbezeichnung bzw. Universitätlehrgang (ULG)
Masterstudium Chemie
Betreuer*in
Christian Becker
DOI
10.25365/thesis.42536
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-20204.01546.601878-2
Link zu u:search
(Print-Exemplar eventuell in Bibliothek verfügbar)
Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Die Interaktion zwischen Fas Rezeptor und Fas Ligand repräsentiert einen der wichtigsten und
gründlich erforschten Signalwege, der für den programmierten Zell Tod verantwortlich ist. Es ist
allgemein bekannt, dass sFasL (soluble form of FasL) durch die Spaltung des Fas Liganden von
Metalloproteasen entstehen. Sowohl der genaue Mechanismus von sFasL als auch seine
biologischen Funktionen sind bis heute unklar und wurden noch nicht vollständig verstanden. Es
ist erwiesen, dass die N-glycosylierte Form des FasL unerlässlich für die effiziente Sekretion ist,
jedoch gibt es nur wenige Informationen über ihre Rolle bei der Interaktion mit Fas Rezeptoren.
Trotz des enormen geleisteten Forschungsbeitrags in diesem Bereich und zahlreichen
krankheitsbezogenen Überexpressionen des sFasL, existieren viele unbeantwortete Fragen und
umstrittene Meinungen bezüglich dessen Rolle. Homogen N-glycosylierter sFas Ligand wurde nie
zuvor synthetisch hergestellt, weswegen große Ungewissheiten über dessen Eigenschaften wie
Stabilität oder Löslichkeit herrschen.
Diese Mastarbeit richtet sich an den Syntheseversuch des homogen N-glycosylierten sFasL und
seines Analogons, um mehr Klarheit in diesem umstrittenen Thema zu schaffen. Fundamentaler
Vorschritt wurde in allen drei Interessensgebieten erreicht, die sich wie folgt zusammenfassen
lassen: Die ersten Schritte hinsichtlich der Trennung und des Transfers eines homogenen NGlycan
Kerns auf einem Peptid, die Optimierung der Fmoc basierten Festphasen Peptid
Synthesebedingungen des Proteins, das in drei Peptidfragmenten unterteilt ist, sowie der
Vorschritt in Bezug auf N- und C-terminalen Peptid Modifikationen mit PEG27, Hydrazid- und
Thioestergruppen. Die nachfolgenden Daten bestätigen, dass die erfolgreiche Synthesemethode
des homogen N-glycosylierten sFasL mit Hilfe von Auxiliar zum Greifen nah ist.
Abstract
(Englisch)
The interaction between Fas receptor and Fas ligand represents one of the most important
pathway for programmed cell death and is very well investigated. It has been widely accepted
that the metalloproteinases cleavage of Fas ligand generates the soluble form of FasL (sFasL).
However, the exact mechanism of sFasL has still not been fully understood and its biological
function remains unclear. The N-glycosylation of sFasL has been proven to be essential for the
efficient secretion, but little is known about their role in the interaction with Fas receptor. There
are still many unanswered questions and controversy about sFasL, despite the fact that there are
numerous disease-related overexpressions of sFasL and therefore tremendous amount of
research has already been done in the past. Never before, has been homogenously Nglycosylated
sFas ligand obtained and only very limited knowledge is available about its
properties such as stability or solubility.
To shed light on this issue, this master thesis is dedicated to the synthesis attempt of the
homogenously N-glycosylated sFasL analogs. Fundamental progress has been made in all three
targeted areas of interest, regarding the first steps toward the isolation and transfer of a
homogeneous core N-glycan to peptides, the optimized synthesis conditions for all three peptide
segments via Fmoc based solide phase peptide synthesis and also the N- and C-terminal peptide
modifications with PEG27, hydrazide and thioesters. The following data demonstrate that the
successful synthesis method of homogeneously N-glycosylated sFasL via auxiliary is within one's
reach.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Englisch)
sFasL auxiliary SPPS solid phase peptide synthesis sialylglycopeptide posttranslational modification N-glycosylation
Schlagwörter
(Deutsch)
sFasL, Auxiliar Festphasen Peptidsynthese Sialylglycopeptid Posttranslationale Modifikation N-Glykosylierung
Autor*innen
Jia Hui Huang
Haupttitel (Englisch)
Auxiliary-mediated synthesis of homogeneously N-glycosylated tumor necrosis factor ligand superfamily 6 (sFasL) analogs
Paralleltitel (Deutsch)
Auxiliar vermittelte Synthese des homogen N-glykosylierten Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily 6 (sFasL) Analogons
Publikationsjahr
2016
Umfangsangabe
77 Seiten : Illustrationen, Diagramme
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Christian Becker
Klassifikation
35 Chemie > 35.76 Aminosäuren, Peptide, Eiweiße
AC Nummer
AC13409000
Utheses ID
37647
Studienkennzahl
UA | 066 | 862 | |