Detailansicht
Multidrug resistant protein 1 in human lung epithelial cells under the influence of anti-asthmatic drugs
Lisa Springer
Art der Arbeit
Diplomarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Fakultät für Lebenswissenschaften
Studiumsbezeichnung bzw. Universitätlehrgang (ULG)
Diplomstudium Pharmazie
Betreuer*in
Franz Gabor
DOI
10.25365/thesis.50368
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-17982.09303.608674-7
Link zu u:search
(Print-Exemplar eventuell in Bibliothek verfügbar)
Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Die vorliegende Studie untersucht Einflüsse verschiedener Arzneistoffe auf multidrug resistance-associated protein 1 (MRP1) in NCI-H441 Zellen. Bei den getesteten Substanzen handelt es sich um Budesonid, Salbutamol, Formoterol fumarate und Dexamethason, welche häufig bei Asthma oder der Chronisch obstruktive Lungenkrankheit verschrieben werden. MRP1 ist ein Effluxtransporter in Plasmamembranen sowie subzellulären Kompartiments und spielt eine protektive Rolle. Neben dem Export von Toxinen trägt MRP1 durch den Auswärtstransport von Antikrebsmedikamenten auch zur Entwicklung von Multidrug-Resistenzen bei.
Methoden:
Um die Einflüsse der zuvor genannten Arzneistoffe auf den MRP1 vermittelten Transport zu untersuchen, wurden Efflux-Experimente durchgeführt. Sowohl lang- als auch kurzfristige Effekte wurden erforscht.
NCI-H441 Zellen wurden mit 5,6-Carboxyfluoresceindiacetat (CFDA), welches intrazellulär in den Fluorophor CF umgewandelt wird, inkubiert. Dieses MRP1-Substrat wird anschließend auswärts transportiert und seine Aktivität in Zellüberstandsproben vermessen.
Zusätzlich wurden Aufnahmestudien durchgeführt um festzustellen, wie die Arzneistoffe die Aufnahme von CFDA beeinflussen. Hierfür wurden die intrazellulären CF-Konzentrationen ermittelt.
Ergebnisse:
Es konnte gezeigt werden, dass der Efflux von CF nach Behandlung der Zellen mit 10 μM, 20 μM, 50 μM Budesonid, 2 μM, 10 μM, 50 μM, Dexamethason, 200 μM Formoterol fumarat und 100 μM Salbutamol sulphat verringert wurde.
Nach 72-stündiger Inkubation der Zellen mit Budesonid, Formoterol fumarat und der höchsten untersuchten Konzentration von Dexamethason wurde eine reduzierte Aufnahme von CFDA beobachtet. Gegensätzlich dazu stiegen die intrazellulären CF-Konzentrationen nach kurzfristiger Behandlung mit 20 µM und 50 µM Budesonid an.
Schlussfolgerung:
Der verringerte Auswärtstransport von CF deutet auf einen inhibierenden Effekt von Budesonid, Dexamethason, Formoterol und Salbutamol sulphat auf MRP1 hin. Allerdings waren die meisten Ergebnisse nicht signifikant.
Abstract
(Englisch)
The present study evaluates effects of certain drugs on multidrug resistance- associated protein 1 (MRP1) in NCI-H441 cells. Drugs of interest were budesonide, salbutamol, formoterol fumarate and dexamethasone, which are often prescribed in patients suffering from asthma or chronic obstructive pulmonary disease. MRP1 is an efflux pump in plasma membranes as well as subcellular compartments and plays a protective role in cellular detoxifying. Apart from exporting toxins, MRP1 also distributes to multidrug resistance by effluxing various anticancer drugs.
Methods:
To evaluate the effects of the aforementioned drugs on MRP1-mediated transport, efflux assays were performed. Both long and short-term effects were investigated.
NCI-H441 cells were incubated with 5,6-carboxyfluorescein diacetate (CFDA), which is intracellularly converted to the fluorescent CF. This MRP1 substrate is then effluxed and its activity in samples of cell supernatant measured.
In addition, uptake assays were performed to determine, how the drugs affected uptake of CFDA. Intracellular levels of CF were investigated for that purpose.
Results:
It was shown that efflux of CF was diminished when treating cells with 10 μM, 20 μM, 50 μM budesonide, 2 μM, 10 μM, 50 μM, dexamethasone, 200 μM formoterol fumarate and 100 μM salbutamol sulphate.
Reduced uptake of CFDA was observed after treating cells for 72 h with budesonide, formoterol fumarate and the highest concentration of dexamethasone tested. Contrary to this outcome, short-term incubation with 20 μM and 50 μM budesonide led to increased intracellular levels of CF.
Conclusion:
The observed reduction in CF efflux indicates an inhibiting effect of budesonide, dexamethasone, formoterol and salbutamol sulphate on MRP1. However, most results were not significant.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Englisch)
MRP1 NCI-H441 salbutamol budesonide dexamethasone formoterol fumarate efflux assays uptake assays
Schlagwörter
(Deutsch)
MRP1 NCI-H441 Salbutamol Budesonid Dexamethason Formoterol fumarat Efflux-Experimente Aufnahmestudien
Autor*innen
Lisa Springer
Haupttitel (Englisch)
Multidrug resistant protein 1 in human lung epithelial cells under the influence of anti-asthmatic drugs
Paralleltitel (Deutsch)
Multidrug Resistance-Related Protein 1 in menschlichen Lungenepithelzellen unter dem Einfluss von antiasthmatischen Arzneistoffen
Publikationsjahr
2017
Umfangsangabe
74 Seiten : Illustrationen, Diagramme
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Franz Gabor
Klassifikation
44 Medizin > 44.40 Pharmazie, Pharmazeutika
AC Nummer
AC14551054
Utheses ID
44533
Studienkennzahl
UA | 449 | | |