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Comparison of the ratios of sulpho-conjugated and glucuro-conjugated phase II metabolites of endogenous steroids in urine samples after administration of testosterone preparations via UHPLC-HRMS
Katharina Zanitzer
Art der Arbeit
Masterarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Fakultät für Chemie
Studiumsbezeichnung bzw. Universitätlehrgang (ULG)
Masterstudium Chemie
Betreuer*in
Gunda Köllensperger
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Alle Rechte vorbehalten / All rights reserved
DOI
10.25365/thesis.56892
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-17294.34354.461079-3
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Abstracts

Abstract
(Deutsch)
Die intramuskuläre Injektion von Testosteronestern ist eine weit praktizierte Form der Leistungssteigerung im Sport. Bei der Dopingkontrolle wird das Steroidprofil der Athleten mittels Analyse von Harnproben beobachtet, um Unregelmäßigkeiten, die durch die Einnahme anaboler androgener Steroide entstehen können, zu detektieren. Ziel dieses Projekts war die Entwicklung einer Methode, in der Flüssigchromatographie und hochauflösende Massenspektrometrie dazu genutzt werden Informationen über die glucuronid- und sulfatkonjugierten Phase-II-Hauptmetaboliten von Testosteron und ihre verhältnismäßige Veränderung nach der Verabreichung in Form von Testosteronestern zu erhalten. Die Methode wurde nach den WADA Kriterien des Internationalen Standards für Laboratorien 9.01 (ISL) validiert und an menschlichen Proben angewandt. In einer früheren Studie erhielten 6 Probanden eine einzelne Injektion von entweder Sustanon® – eine Mischung von 30 mg Testosteronpropionat, 60 mg Testosteronphenylpropionat, 60 mg Testosteronisocaproat und 100 mg Testosterondecanoat – oder Nebido® – 1000 mg Testosteronundecanoat. Harnproben wurden bis 60 Tage nach der Verabreichung gezogen. Die Proben wurden mittels Festphasenextraktion zur Analyse vorbereitet. Die Ergebnisse zeigen die Änderung der Konzentrationen und der Verhältnisse von Glucuroniden und Sulfaten zueinander über die Probenahmezeit. Sie wurden auch mit dem T/E Verhältnis verglichen, der gewöhnlich via Gaschromatographie-Massenspektrometrie nach hydrolytischer Abtrennung der Glucuronsäure festgestellt wurde. Aufgrund der simultanen Detektion von Sulfat- und Glucuronidmetaboliten endogener Steroide konnte ein teilweise hoher Verstärkungseffekt der Veränderungen in Post-Injektionsproben festgestellt werden. Jedoch scheint die Verstärkung vom natürlichen T/E Verhältnis der Testpersonen abhängig zu sein.
Abstract
(Englisch)
Intra-muscular injection of testosterone esters is a widely practised way of performance enhancement in sports. In doping control, the steroidal profile of athletes is monitored via the analysis of urine samples to detect abnormalities caused by administration of anabolic androgenic steroids (AAS). The aim of this project was to develop a complementary method that uses liquid chromatography and high resolution mass spectrometry to gain information about the glucuronide- and sulphate-conjugated phase II main metabolites of testosterone and their ratio changes after administration as testosterone esters. The method was validated according to the WADA criteria of the International Standard for Laboratories 9.01 (ISL) and applied on human samples. In a prior clinical study, 6 subjects had received a single injection of either Sustanon® – a mixture of 30 mg testosterone propionate, 60 mg testosterone phenylpropionate, 60 mg testosterone isocaproate and 100 mg testosterone decanoate – or Nebido® – 1000 mg of testosterone undecanoate. Urine samples were taken up to 60 days after the application. The samples were prepared via solid phase extraction. The results show the change of the concentrations and the ratios of glucuronides to sulphates over the sampling period. They were also compared with the T/E ratio, which was determined as usual via gas chromatography mass spectrometry after hydrolytic separation of glucuronic acid. Due to the simultaneous detection of the steroid sulphates and glucuronides, a partially high amplification effect of the alterations in post-administration samples could be seen. Though, the amplification seems to be dependent on the natural T/E ratio of the subject.

Schlagwörter

Schlagwörter
(Englisch)
testosterone testosterone ester steroids phase II metabolites sulphates glucuronides ratio urine doping liquid chromatography mass spectrometry
Schlagwörter
(Deutsch)
Testosteron Testosteron-Ester Steroide Phase II Metaboliten Sulfate Glucuronide Verhältnis Harn Doping Flüssigchromatographie Massenspektrometrie
Autor*innen
Katharina Zanitzer
Haupttitel (Englisch)
Comparison of the ratios of sulpho-conjugated and glucuro-conjugated phase II metabolites of endogenous steroids in urine samples after administration of testosterone preparations via UHPLC-HRMS
Paralleltitel (Deutsch)
Vergleich der Verhältnisse von sulfo-konjugierten und glucuro-konjugierten Phase II Metaboliten endogener Steroide in Harnproben nach Verabreichung von Testosteron-Präparaten via UHPLC-HRMS
Publikationsjahr
2019
Umfangsangabe
59 eiten : Diagramme
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Gunda Köllensperger
Klassifikationen
35 Chemie > 35.23 Analytische Chemie: Allgemeines ,
35 Chemie > 35.24 Klassische analytische Chemie ,
35 Chemie > 35.26 Massenspektrometrie ,
35 Chemie > 35.29 Chromatographische Analyse, Elektrophorese ,
35 Chemie > 35.74 Enzyme, Hormone, Vitamine
AC Nummer
AC15485960
Utheses ID
50257
Studienkennzahl
UA | 066 | 862 | |
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