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Tristetraprolin beyond cytokine mRNA decay
Nora Elaine Bischoff
Art der Arbeit
Masterarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Zentrum für Molekulare Biologie
Studiumsbezeichnung bzw. Universitätlehrgang (ULG)
Masterstudium Molekulare Mikrobiologie, Mikrobielle Ökologie und Immunbiologie
Betreuer*in
Pavel Kovarik
DOI
10.25365/thesis.64643
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-29038.38335.945660-8
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(Print-Exemplar eventuell in Bibliothek verfügbar)
Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Für die Aufrechterhaltung eines gesunden Körperzustandes ist eine strenge Regulation des Immunsystems erforderlich. Dabei ist Tristetraprolin (TTP) ein wichtiger Faktor, da es die mRNA von Zytokinen und Chemokinen destabilisiert, wodurch es zum Abklingen der Entzündung und zur Wiederherstellung der Immunhomöostase kommt.
Vorangehende Experimente haben gezeigt, dass Mäuse, denen TTP in ihrer myeloiden Zelllinie fehlt, Infektionen mit Streptococcus pneumoniae besser überleben können und reduzierte Entzündungsreaktionen zeigen. Um die Rolle von TTP in diesem Infektionsmodel zu untersuchen, verfolgten wir zwei unterschiedliche Hypothesen.
Einerseits könnte die verbesserte Überlebenschance an verstärkter Toleranz gegenüber pathogenverursachten Gewebeschäden liegen. Als Vertreter der Toleranzfaktoren wurde Amphiregulin (Areg), ein EGF Rezeptor Ligand, welcher mit Zelldifferenzierung, -proliferation und Wundheilung in Verbindung gebracht wird, daraufhin getestet, ob TTP dessen mRNA bindet und destabilisiert. Ein Reporterkonstrukt, das Aregs 3‘ untranslatierte Region hinter einem Luziferase-Gen beinhaltet, wurde in mRNA Stabilitätstests und Immunpräzipitationsexperimenten eingesetzt, doch es konnte nicht gezeigt werden, ob TTP an Areg mRNA bindet, da die experimentelle Methode nicht ausreichend optimiert werden konnte.
Andererseits könnte eine erhöhte Resistenz gegen das Pathogen, ausgedrückt durch eine effektivere Eliminierung der Bakterien, den beobachteten Phänotyp erklären. Daher wurde die Phagozytose verschiedener Bakterien und Latexperlen durch unterschiedliche Makrophagenarten untersucht. Dies zeigte, dass TTP Phagozytoseaktivität verringert. Während TTP anscheinend keine Rolle beim Beseitigen von bereits aufgenommenen Bakterien spielt, könnte die gesteigerte Partikelaufnahme der Grund für die erfolgreichere Immunantwort in infizierten Mäusen ohne myeloides TTP sein.
Diese Studie erweitert die Auffassung von TTP und zeigt das Protein als einen antiinflammatorischen Faktor, der auch am Mechanismus der Phagozytose beteiligt ist.
Abstract
(Englisch)
Tight regulation of the immune system’s response to pathogens is vitally important for the health and survival of the host. Contributing to the resolution of inflammation and the re-establishment of immune homeostasis is tristetraprolin (TTP), which is often only seen as cytokine and chemokine mRNA destabilizing factor.
Previous work provided the interesting finding that mice lacking myeloid TTP survived Streptococcus pneumoniae infections better while also displaying reduced inflammation. To assess the role of TTP in this infection model, we investigated two different hypotheses. On the one hand, increased survival could be due to higher tolerance to pathogen-caused tissue damage. In this context, Amphiregulin (Areg), an EGF receptor ligand associated with cell differentiation, proliferation and wound healing, was examined as a potential TTP target. A reporter construct containing the 3’UTR of Areg downstream of a luciferase gene was used; however, mRNA stability assays and immunoprecipitation experiments failed to show definite TTP binding to Areg mRNA, probably due to technical issues.
On the other hand, improved resistance to the pathogen could explain the observed phenotype. Therefore, phagocytosis of different bacteria and latex beads was investigated in multiple macrophage types, showing that TTP limits particle uptake by macrophages. While the killing of ingested bacteria seems not to be affected by TTP, the increased phagocytosis of bacteria plays a role in a more successful response to bacterial infection in mice lacking myeloid TTP.
This study broadens the view on TTP and establishes the protein as an anti-inflammatory factor which is also involved in phagocytosis.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Englisch)
Tristetraprolin inflammation macrophages bacterial infection amphiregulin phagocytosis
Schlagwörter
(Deutsch)
Tristetraprolin Entzündung Makrophagen bakterielle Infektion Amphiregulin Phagozytose
Autor*innen
Nora Elaine Bischoff
Haupttitel (Englisch)
Tristetraprolin beyond cytokine mRNA decay
Paralleltitel (Deutsch)
Tristetraprolin: mehr als nur Zytokin-mRNA Zerfall
Publikationsjahr
2020
Umfangsangabe
60 Seiten : Diagramme
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Pavel Kovarik
AC Nummer
AC16083179
Utheses ID
57360
Studienkennzahl
UA | 066 | 830 | |