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LC-MS analysis of oxylipins in plasma samples from patients undergoing extracorporeal photopheresis
Dexin Dong
Art der Arbeit
Masterarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Fakultät für Chemie
Studiumsbezeichnung bzw. Universitätlehrgang (ULG)
Masterstudium Biologische Chemie
Betreuer*in
Christopher Gerner
DOI
10.25365/thesis.71529
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-27474.15360.541667-2
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(Print-Exemplar eventuell in Bibliothek verfügbar)
Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Extrakorporale Photopherese ist eine Behandlung, die seit Jahrzehnten bei CTCL eingesetzt wird. Die Mechanismen dahinter konnten jedoch noch nicht vollständig erklärt werden. Es gibt Theorien, dass die therapeutische Wirkungen durch das Aktivieren von DCs oder die Phagozytose der apoptotischen Lymphozyten erzeugt wird. In dieser Masterarbeit werden die Oxylipin-Profile in den Plasmaproben von sechs Patienten, die mit ECP behandelt werden, im Verlauf von zwei Tagen untersucht. Diese Molekülen erfüllen eine wichtige Rolle als Lipidmediatoren in der Immunantwort, und könnten möglicherweise im Verlauf der ECP-Behandlung das Immunsystem beeinflussen. Nach SPE und UHPLC-MS/MS wurden 32 Peaks gewählt und quantifiziert, die zu den Oxylipinen, ihren PUFA-Precursors und deren Isomeren und Isobaren gehören. An den zwei Tagen wurden unterschiedliche Analyten nach der ECP-Behandlung signifikant erhöht. Dies ist wahrscheinlich auf die kleine Probeanzahl zurückzuführen, welche die statistische Analyse beschränkt. Die PUFA-Precursors und 12-HEPE/8-HEPE hatten die größten Fold-Changes in den Proben nach der Behandlung im Vergleich zu den Proben vor der Behandlung. Am zweiten Tag vor der Behandlung waren die meisten Analyten in den Proben auf Levels zurückgekehrt, die am ersten Tag in den Proben vor der Behandlung ähnlich waren. Dies deutet auf eine kurzfristige Wirkung von ECP auf das Oxylipin-Profil im Plasma. Als Teil der Masterarbeit wurde auch eine UHPLC-MS/MS Methodenentwicklung teilweise durchgeführt. Die neue Methode soll eine kürzere Laufzeit im Vergleich zu der etablierten Methode der Oxylipin-Analyse der ECP Plasmaproben haben. Die ersten Messungen der Standardlösungen haben vielversprechende Ergebnisse geliefert. Basierend auf die Resultate der Arbeit, werden in der Abteilung eventuell weiterführende Studien durchgeführt.
Abstract
(Englisch)
Extracorporeal photopheresis is a treatment for CTCL that has been present for decades. However, the mechanisms behind it's therapeutic effects are still not well understood, although there are theories that it is due to the activation of DCs or the phagocytosis of apoptotic lymphocytes. In this master's thesis, the oxylipin profiles of plasma samples from six patients undergoing ECP therapy over the course of two days were analysed. These molecules are known to play a vital role as lipid mediators in immune response and may provide some information on the effects of ECP on the immune system. After SPE and UHPLC-MS/MS analysis, 32 peaks belonging to oxylipins, their PUFA precursors as well as unknown isomers and isobars were chosen and quantified. The analytes which were significantly increased after ECP therapy were different on the two different days. This may be in part due to the small sample size, limiting the statistical analysis. Of the identified analytes, the PUFA precursors and 12-HEPE/8-HEPE had the largest fold change in samples post-treatment compared to pre-treatment. On the second day, most of the analytes in the pre-treatment samples had returned back to levels similar to the pre-treatment samples of the first day, implying that the effects of ECP on the oxylipin profile in plasma is short-lived. A new UHPLC-MS/MS method for the analysis of oxylipins was also partially developed as part of the master's thesis with a shorter runtime compared to the established method used for oxylipin analysis of the ECP plasma samples. Initial measurements of standard solutions have shown promising results. Further studies will eventually be carried out in the group based on the results of the thesis.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Deutsch)
LC-MS Oxylipin Extrakorporale Photopherese
Schlagwörter
(Englisch)
LC-MS Oxylipin Extracorporeal Photopheresis
Autor*innen
Dexin Dong
Haupttitel (Englisch)
LC-MS analysis of oxylipins in plasma samples from patients undergoing extracorporeal photopheresis
Paralleltitel (Deutsch)
LC-MS Analyse von Oxylipinen in Plasmaproben von mit extrakorporaler Photopherese behandelten Patienten
Publikationsjahr
2022
Umfangsangabe
V, 61 Seiten : Illustrationen
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Christopher Gerner
Klassifikation
35 Chemie > 35.23 Analytische Chemie: Allgemeines
AC Nummer
AC16565289
Utheses ID
62373
Studienkennzahl
UA | 066 | 863 | |
