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The influence of desmin and SPARC on cardiomyogenesis of cardiovascular progenitor cells
Franziska Hofstetter
Art der Arbeit
Masterarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Zentrum für Molekulare Biologie
Studiumsbezeichnung bzw. Universitätlehrgang (ULG)
Masterstudium Molekulare Biologie
Betreuer*in
Georg Weitzer
DOI
10.25365/thesis.74177
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-20183.73019.356030-3
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(Print-Exemplar eventuell in Bibliothek verfügbar)
Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Seit dem Nachweis von Stammzellen im adulten Herzen wurden diese ein wichtiger Aspekt der Forschung zur Prävention und Heilung kardiovaskulärer Erkrankungen. Diese Arbeit befasst sich mit einer spezifischen Population an kardiovaskulären Progenitorzellen und soll zum Verständnis der Signalwege in diesen beitragen. Die zwei Proteine Desmin und SPARC und deren Rolle während der Kardiomyogenese sind dabei von besonderem Interesse. Zur Untersuchung dieser Rolle beschäftigt sich der erste Teil der Arbeit mit der Etablierung von homozygoten desmin und sparc knock-out Zelllinien, indem auf spontane, inter-chromosomale Rekombination des KO Allels in etablierten heterozygoten Zelllinien selektioniert wird. Leider konnte kein sparc-/- oder desmin-/- Klon identifiziert werden, allerdings konnte eine verlässliche Methode zur Genotypisierung von sparc etabliert werden. Der zweite Teil der Arbeit befasst sich mit der Frage, ob die Expression der Gene desmin und sparc, sowie andere "genes of interest", direkt durch TGFβ Signale bzw. deren Blockade via Specific inhibitor of Smad3 (SIS3) beeinflusst werden. Der größte Einfluss beider Komponenten zeigte sich am Gen brachyury. Ebenso schien desmin durch SIS3 hochreguliert zu werden. Die Aufklärung des vollständigen Signalnetzwerkes zeigt sich allerdings weiterhin als schwierig, da sekundäre Effekte zwischen den "genes of interest" ebenfalls eine Rolle spielen und unsere Resultate beeinflussen können. Zukünftige Experimente könnten davon profitieren, verschiedene Smad Inhibitoren sowie TGFβ2 in einem ähnlichen experimentellen Setup zu testen, sowie auf eine Kulturmethode mit basolateraler Aufnahmemöglichkeit für die Zellen umzusteigen.
Abstract
(Englisch)
Ever since the view of the heart as a post-mitotic organ was challenged and stem cells were found in the adult heart, they have become subject of intense research for stem cell therapies. This work deals with a specific population of cardiovascular progenitor cells and ultimately contributes to the understanding of the signalling networks within. There are two proteins of special interest, Desmin and SPARC, and the Group Weitzer aims to understand their role in cardiomyogenesis. For this, one part of this work deals with creating homozygous sparc and desmin knock-out cell lines by selecting for spontaneous inter-chromosomal recombination of a knock-out allele in our established heterozygous cell lines. Unfortunately, no sparc-/- or desmin-/- clone could be identified, however we could establish a reliable method of genotyping our cells for sparc. The second part of this work aims to answer the question, whether the genes sparc and desmin, as well as other genes of interest (GOIs), are directly influenced by TGFβ signalling and inhibition thereof by Specific Inhibitor of Smad3 (SIS3). The most consistent influence of exogenous TGFβ1 and SIS3 were seen on the gene brachyury, as well as an upregulation of desmin by SIS3. Untangling the signalling pathways proved to be a complicated feat, as secondary, regulatory effects between our GOIs might play into our results. Future experiments could profit from trying different Smad inhibitors or TGFβ2 in a combination with SPARC, as well as a culture method that allows basolateral uptake of our additives.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Deutsch)
Kardiomyogenese Herzentwicklung Stammzellen Desmin SPARC TGFb-Pathway
Schlagwörter
(Englisch)
Cardiomyogenesis Stem Cells Desmin Sparc TGFb-Pathway
Autor*innen
Franziska Hofstetter
Haupttitel (Englisch)
The influence of desmin and SPARC on cardiomyogenesis of cardiovascular progenitor cells
Paralleltitel (Deutsch)
Der Einfluss von Desmin und SPARC auf die Kardiomyogenese von kardiovaskulären Vorläuferzellen
Publikationsjahr
2023
Umfangsangabe
67 Seiten : Illustrationen
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Georg Weitzer
AC Nummer
AC16929270
Utheses ID
68071
Studienkennzahl
UA | 066 | 834 | |