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Effects of VEGF-C-presenting MSC-derived extracellular vesicles on lymphatic endothelial cells
Alireza Sahl Abadi
Art der Arbeit
Masterarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Fakultät für Lebenswissenschaften
Studiumsbezeichnung bzw. Universitätlehrgang (ULG)
Masterstudium Molecular Biology
Betreuer*in
Johannes Grillari
DOI
10.25365/thesis.79878
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-18107.13026.815186-4
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Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Lymphödem, eine chronische Erkrankung, die durch beeinträchtigten und unzureichenden Abfluss von Lymphflüssigkeit und deren anschließende Ansammlung verursacht wird, kann möglicherweise durch die Förderung der Lymphangiogenese mittels Stimulation von lymphatischen Endothelzellen (LECs) gelindert werden. Extrazelluläre Vesikel (EVs) werden zunehmend als wichtige Mediatoren der interzellulären Kommunikation betrachtet, mit starkem Potenzial in der regenerativen Medizin aufgrund ihrer Fähigkeit, bioaktive Moleküle zu transportieren, ihrer hohen Biokompatibilität und ihrer Kapazität, biologische Barrieren zu überwinden. Das gezielte Ansprechen von LECs mit EVs zur Verstärkung der Lymphangiogenese bietet eine vielversprechende therapeutische Strategie zur Wiederherstellung des interstitiellen Flüssigkeitsgleichgewichts in betroffenen Geweben. Zu diesem Zweck wurden gentechnisch veränderte EVs, die rekombinante CD81-P1-VEGF-CKonstrukte exprimieren und den vaskulären endothelialen Wachstumsfaktor-Rezeptor 3 (VEGFR-3) auf den Zielzellen adressieren, getestet, um mögliche Verbesserungen in Zellbindung, Aufnahme, Proliferation und Migration im Vergleich zum WT zu untersuchen. Um die Bindung und Aufnahme der modifizierten EVs an die ZielVEGFR3-Rezeptoren auf Zielzellen, nämlich humane dermale LECs (HDLECs) und gentechnisch veränderte BaF3-Zellen, zu evaluieren, wurden die EVs mit CellMask™ Deep Red (CMDR), einem hochwirksamen lipophilen Membranfärbemittel, markiert und ihre Interaktion mit Zellen anschließend mittels Durchflusszytometrie analysiert. Weitere Techniken, wie Dot Blot, Scratch Assay, alamarBlue- und MTT-Assays, wurden ebenfalls eingesetzt, um die Funktion der EVs, die Rezeptoraktivierung sowie die Induktion von Zellproliferation und -migration zu charakterisieren und zu bewerten. Die Ergebnisse zeigen einen deutlichen Vorteil der rekombinanten Konstrukte in allen genannten Parametern im Vergleich zum WT und verdeutlichen ein spannendes Potenzial für zukünftige Forschung.
Abstract
(Englisch)
Lymphedema, a chronic condition caused by impaired and insufficient lymphatic fluid drainage resulting in its subsequent accumulation, may be alleviated by promoting lymphangiogenesis through stimulation of lymphatic endothelial cells (LECs). Extracellular vesicles (EVs) are increasingly viewed as important mediators of intercellular communication with strong potential in regenerative medicine due to their ability to carry bioactive molecules, high biocompatibility, and capacity to cross biological barriers. Targeting LECs with EVs to enhance lymphangiogenesis offers a promising therapeutic strategy for restoring interstitial fluid balance in affected tissues. For this purpose, engineered EVs expressing recombinant CD81-P1-VEGF-C constructs to target vascular endothelial growth factor receptor 3 (VEGFR-3) on the target cells were put to the test to examine potential improvements in cell binding, uptake, proliferation, and migration compared to wild-type (WT). To assess the binding and uptake of engineered EVs to target VEGFR3 receptors on target cells, namely, human dermal LECs (HDLECs) and engineered BaF3 cells, the EVs were stained with CellMask™ Deep Red (CMDR), a highly effective lipophilic membrane dye, and their interaction with cells was subsequently examined by flow cytometry. Other techniques, such as dot blot, scratch assay, alamarBlue, and MTT assays, were also utilized to characterize and assess EV function, receptor activation, and induction of cell proliferation and migration. The results show a promising advantage of the recombinant constructs in all the aforementioned parameters compared to WT, showcasing exciting potential for future research.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Deutsch)
Lymphödem Extrazelluläre Vesikel Lymphatischen Endothelzellen Lymphangiogenese VEGF-C
Schlagwörter
(Englisch)
Lymphedema Extracellular vesicles Lymphatic endothelial cells Lymphangiogenesis VEGF-C
Autor*innen
Alireza Sahl Abadi
Haupttitel (Englisch)
Effects of VEGF-C-presenting MSC-derived extracellular vesicles on lymphatic endothelial cells
Publikationsjahr
2025
Umfangsangabe
51 Seiten : Illustrationen
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Johannes Grillari
Klassifikation
42 Biologie > 42.13 Molekularbiologie
AC Nummer
AC17733539
Utheses ID
78560
Studienkennzahl
UA | 066 | 865 | |