Detailansicht
Method development for gas chromatographic analysis of long-chain fatty acids in saliva and other human matrices
Hanna Schmierer
Art der Arbeit
Masterarbeit
Universität
Universität Wien
Fakultät
Fakultät für Lebenswissenschaften
Studiumsbezeichnung bzw. Universitätlehrgang (ULG)
Masterstudium Ernährungswissenschaften
Betreuer*in
Karl-Heinz Wagner
DOI
10.25365/thesis.80450
URN
urn:nbn:at:at-ubw:1-25963.29265.861973-7
Link zu u:search
(Print-Exemplar eventuell in Bibliothek verfügbar)
Abstracts
Abstract
(Deutsch)
Während Plasmaproben traditionell für die Analyse langkettiger Fettsäuren verwendet werden, haben Diagnostikmethoden auf Basis von Speichel in den letzten Jahren als nicht-invasive, kostengünstige und benutzerfreundliche Alternative zunehmend an Bedeutung gewonnen. Beide Probenarten erfordern zuverlässige analytische Verfahren, weshalb die Gaschromatographie besonders häufig eingesetzt wird. Da sie jedoch nur flüchtige Verbindungen nachweisen kann, müssen langkettige Fettsäuren vor der Analyse zunächst in ihre entsprechenden Methylester derivatisiert werden. Diese Masterarbeit konzentriert sich auf die Optimierung der Probenvorbereitung durch die Testung verschiedener Derivatisierungs- und Extraktionsmethoden sowie die Bewertung des Einflusses von Probenvorbereitungstools wie einem Vakuumkonzentrator. Die Zuverlässigkeit der Methode wurde außerdem durch die Untersuchung verschiedener Einflussfaktoren auf die Fettsäureprofile überprüft, darunter methodische Aspekte (gepoolte vs. sequenzielle Speichproben), diätetische Bedingungen (Frühstück vs. nüchtern vor der Probenentnahme) sowie zeitliche Faktoren (Veränderungen über drei aufeinanderfolgende Tage). Eine zentrale Herausforderung bestand darin, ausreichend hohe Peaks zu erzielen, um zuverlässige Ergebnisse zu erhalten und gleichzeitig Verunreinigungen zu minimieren. Aufgrund anhaltender Schwierigkeiten mit den Speichelproben wurden Wangenepithelproben und Kapillarblut als alternative Probenarten getestet. Wangenepithelproben zeigten das größte Potenzial für die Fettsäureanalyse, während Kapillarblut trotz seiner Schwankungen potenziell für weitere Analysen in Betracht gezogen werden kann. Die ursprünglich verwendete Derivatisierungsmethode mit NaOH und BF₃ erwies sich als die erfolgreichste, während keine der getesteten Extraktionsmethoden die Peak-Flächen wesentlich verbessern konnte. Die Ergebnisse zur Verwendung des Vakuumkonzentrators waren nicht eindeutig. Obwohl eine vollständig zuverlässige diagnostische Methode für Speichel- oder Wangenzelllipide erst etabliert werden muss, bietet diese Masterarbeit eine solide Grundlage, um die Entwicklung nicht- oder minimalinvasiver, kostengünstiger Diagnostiklösungen voranzutreiben.
Abstract
(Englisch)
While plasma samples have traditionally been used for long-chain fatty acid analysis, saliva diagnostics have gained importance as a non-invasive, cost-effective and user-friendly alternative in recent years. Given the need for robust analytical techniques in both matrices, gas chromatography (GC) is commonly employed for fatty acid profiling. However, as GC can only analyze volatile compounds, long-chain fatty acids must first be derivatized into their corresponding methyl esters. This thesis focuses on optimizing sample preparation by exploring and comparing different derivatization and extraction methods, as well as evaluating the impact of tools like a vacuum concentrator. The method's reliability was further assessed by examining the effects of different conditions on fatty acid profiles, including sampling (pooled vs. sequential saliva samples), dietary (fasting vs. breakfast before collection) and temporal factors (variations over three consecutive days). A key challenge was achieving sufficiently high GC peaks for reliable data while minimizing impurities. Due to persistent difficulties with saliva samples, cheek cells and capillary blood were tested as alternative matrices. Cheek cells showed the highest fatty acid peaks, while capillary blood, despite inconsistencies, may warrant further investigation. The original methylation method using NaOH and BF₃ was the most successful, while none of the evaluated extraction methods led to a notable increase in fatty acid peak areas. The results from the vacuum concentrator were inconclusive. Although a fully reliable diagnostic method for salivary or cheek cell lipids is still to be established, this thesis provides a solid foundation for advancing non- or minimally invasive, affordable diagnostic solutions.
Schlagwörter
Schlagwörter
(Deutsch)
Langkettige Fettsäuren Speichel Gaschromatografie Methodenentwicklung Wangenepithelproben Extraktionsmethoden Folch Matyash Kapillarblut Humanproben FAMEs Fettsäureanalyse Probenvorbereitung Methylierungsmethoden Lipide GC Wangenzelllipide
Schlagwörter
(Englisch)
long-chain fatty acids saliva gas chromatography GC buccal cells cheek cells human samples method development FAMEs capillary blood Folch Matyash extraction methods fatty acid analysis sample preparation methylation methods lipids
Autor*innen
Hanna Schmierer
Haupttitel (Englisch)
Method development for gas chromatographic analysis of long-chain fatty acids in saliva and other human matrices
Paralleltitel (Deutsch)
Methodenentwicklung zur gaschromatographischen Analyse langkettiger Fettsäuren in Speichel und anderen Humanproben
Publikationsjahr
2025
Umfangsangabe
V, 102 Seiten : Illustrationen
Sprache
Englisch
Beurteiler*in
Karl-Heinz Wagner
AC Nummer
AC17787444
Utheses ID
78940
Studienkennzahl
UA | 066 | 838 | |